干热灭菌的效果监测办法:
a、化学监测法
检测方法:将既能指示温度又能指示温度持续时间的化学指示剂3个~5个分别放入待灭菌的物品中,并置于灭菌器zui难达到灭菌的部位。经一个灭菌周期后,取出化学指示剂,据其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。
b、物理检测法(热电偶< a>">热电偶检测法)
检测方法:检测时间,将多点温度检测仪的多个探头分别放于灭菌器各层内、中、外各点。关好柜门,将导线引出,由记录仪< a>">记录仪中观察温度上升与持续时间。若所示温度(曲线)达到预置温度,则灭菌温度合格。
c、生物检测法
(1)指示菌株:枯草杆菌黑色变种芽孢(ATCC9372),菌片含量为5.0×105 cfu/片~5×106cfu/片。其抗力应符合以下条件:在温度160℃±2℃时,其D值为1.3~1.9min,存活时间≥3.9min,杀灭时间≤19min。
(2)检测方法:将枯草杆菌芽孢菌片分别装入灭菌试管内(1片/管)。灭菌器与每层门把手对角线内,外角处放置2个含菌片的试管,试管帽置于试管旁,关好柜门,经一个灭菌周期后,待温度降至80℃时,加盖试管帽后取出试管。在无菌条件下,加入普通营养肉汤培养基(5ml/管),以36℃±1℃培养48h,观察初步结果,无菌生长管继续培养至第七日。
(3)结果判定:若每个指示菌片接种的肉汤管均澄清,判为灭菌合格,若指出菌片之一接种的肉汤管混浊,判为不合格,对难以判定的肉汤管,取0.1ml接种于营养琼脂平板,用灭菌L棒涂匀,放36℃±1℃培养48h,观察菌落形态,并做涂片染色镜检,判断是否有指示菌生长,若有指示菌生长,判为不合格;若无指示菌生长,判为灭菌合格。